熒光原位雜交與免疫熒光的區(qū)別詳解
點擊次數(shù):34 更新時間:2025-05-26
熒光原位雜交與免疫熒光的區(qū)別:
原位雜交是從分子水平檢測,免疫熒光是從蛋白水平檢測。
免疫熒光是利用抗原抗體反應進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。
熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪制方法,使用熒光素標記探針,以檢測探針和分裂中期的染色體或分裂間期的染色質(zhì)的雜交。
熒光原位雜交的原理:
FISH(fluorescence in situ hybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。
它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經(jīng)變性-退火-復性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。
將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物w素、地高x辛,可利用該報告分。
免疫熒光的原理:
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。
由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發(fā)生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。
免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應。